polyplus轉染試劑INTERFERin®的應用

polyplus轉染試劑INTERFERin®在1nM siRNA下已經提供了非常高的沉默效率，并且可以用于多種粘附細胞和懸浮細胞。使用低濃度的siRNA可以避免脫靶效應，其溫和的作用模式確保了更可靠的數據和優異的細胞活力。由于與血清和抗生素的兼容性，INTERFERin®易于使用，也非常適合轉染miRNA和其他寡核苷酸，如pre-miRNA、mimic miRNA等。

polyplus轉染試劑INTERFERin®應用方向廣泛，主要在以下幾個方面：

一、RNA干擾機制研究

RNA干擾是由細胞質中的RNA分子介導的，也稱為siRNA，意思是“小干擾RNA"。這些siRNA寡核苷酸長21至25個堿基對，其序列與信使RNA（mRNA）特異性互補。siRNA募集RISC復合物（“RNA誘導的沉默復合物"）與其靶mRNA結合，以切割其，從而導致蛋白質表達的沉默（圖1）。

圖1：細胞中的RNA沉默機制。

二、基因沉默實驗在進行動手實驗之前，siRNA必須根據研究目標進行設計，并由專門的供應商合成。然后是siRNA轉染步驟本身，然后是基因沉

默和/或表型測定的測量。

將siRNA引入細胞會產生一些副作用。這些脫靶效應是通過識別誘導翻譯抑制和/或mRNA降解的3'UTR序列產生的，或者通過識

別靶基因以外的mRNA產生的，這兩者都會導致細胞中的非特異性沉默。

為了避免脫靶效應，siRNA必須設計有幾種算法，以確保精確調整靶向。此外，可以通過使用盡可能低的siRNA濃度來避免非特

異性相互作用。

在分析結果時，確保知道感興趣的蛋白質和mRNA的半衰期，并在轉染后24至96小時測量相應的基因沉默。理想情況下，基因

沉默應該在mRNA和蛋白質水平上進行評估。

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