RNA提取的注意事項

一、如何保存提取出的RNA？

提取后溶解于RNase-free Water中，RNA樣品建議立即進行下游實驗，如需儲存，建議分裝保存于-80℃。避免多次取用樣品，反復凍融。

二、為什么提取的RNA有降解？

1.使用的組織材料不新鮮。提取RNA應采用新鮮的組織材料，或將新鮮組織材料用液氮迅凍后置于-80℃保存。

2.提取RNA時使用的試劑及耗材中混有RNase。

三、RNA分離過程中水相與有機相分離不全，提取的RNA含量低。

可能是氯仿混合不充分，離心時轉速不夠或離心時間太短。使得回收的RNA水相低于500 µL。

四、如何防止提取RNA過程中RNA的降解？

1.實驗過程中使用的玻璃器皿使用前可于180 ℃干烤8 h以上，塑料制品要用氯仿沖洗。焦磷酸二乙酯（DEPC）是RNase的強烈抑制劑，RNA提取過程和逆轉錄過程中所用的水用DEPC處理；

2.實驗人員的手為RNase的重要污染源，進行RNA實驗時應始終戴手套，并應勤換手套；

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