夾心法與競爭法的ELISA檢測原理是什么？

ELISA的原理是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。那么你知道夾心法與競爭法的ELISA檢測原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！

一、夾心法原理

夾心法使用的是兩個抗體夾抗原或者兩個抗原夾抗體的方法，這種復合物被稱之為三明治夾心結構，利用一對配對wan全的抗體，可以特異性檢測抗原，當然主要針對的是具有至少2個以上抗原表位的抗原，抗體的配對可是門技術活，很多公司可以生產抗體，但是配對卻很少做，主要原因在于篩選的難度，可能開發的幾十株針對同一抗原的抗體，都很難有一對合適的可以配對，原因是多方面的，有抗原的表位、構象等原因，也有抗體效價的原因，當然還有篩選成本的原因，所以每一個ELISA試劑盒都是經過多次和長期的驗證得來的。

二、競爭法原理

競爭法的使用相對來說就窄一點了，其原理是利用抗原抗體結合的可逆性，但在合適濃度時又可達到結合和解離的穩定期，那么親和力更強的抗體自然就能更有效的結合抗原了。一般結合的解離使用最多的就是SPR和BLI技術了，可以高精度或高通量的測抗原/抗體、受體/配體的親和力。

利用已知的抗原進行標記（抗原A），作為對照，實驗組加入樣本（抗原B）及標記抗原，與對照組相比，顯色低，則該抗原A與抗原B競爭結合抗體，這種方法一般用于抗原材料中的干擾物質不易除去，或不易得到足夠的純化抗原。

包被抗體進行競爭法呢，一般用于ADA，競爭、非競爭抗體鑒定/篩選，抗體的競爭篩選是有效的免疫原性檢測手段之一。

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