抗體的保存條件有哪些？

你知道抗體的保存條件都有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、抗體的穩(wěn)定性

抗體是免疫系統(tǒng)中最重要的分子之一，其穩(wěn)定性是自然進(jìn)化篩選的結(jié)果。在眾多物種中，抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，分子中70% 氨基酸殘基(免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域)以beta片層(beta-sheet)形式堆疊，形成緊密并能耐受蛋白酶作用的“三明治"結(jié)構(gòu)，輕鏈和重鏈通過(guò)保守的二硫鍵形成具有三個(gè)結(jié)構(gòu)域的免疫球蛋白，大大提高了分子本身的穩(wěn)定性。

抗體主要涉及化學(xué)或物理不穩(wěn)定性。化學(xué)不穩(wěn)定性是指多肽或蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)內(nèi)共價(jià)鍵的形成或破壞。蛋白質(zhì)化學(xué)失活機(jī)制主要包括聚合作用、重要氨基酸的變化，如肽鍵在稀酸條件下被水解；半胱氨酸、色氨酸、甲硫氨酸的氧化；二硫鍵的還原；用金屬離子修飾巰基形成硫醇鹽；天冬酰胺與谷氨酰胺的脫酰胺；氨基酸消旋，寡聚蛋白解聚成單體等。而抗體結(jié)構(gòu)的展開(kāi)、解離、變性、聚集和沉淀被稱(chēng)為構(gòu)象或物理不穩(wěn)定性。

zhong所周知，儲(chǔ)存條件（pH值、緩沖液類(lèi)型、穩(wěn)定劑、防腐劑、蛋白酶抑制劑、溫度和反復(fù)解凍）在抗體穩(wěn)定性中起著至關(guān)重要的作用。

二、保存溫度

每種樣品均有其穩(wěn)定的溫度范圍，溫度升高會(huì)引起許多物理和化學(xué)變化，如溫度升高10℃，氧化反應(yīng)約加快數(shù)倍，酶促反應(yīng)約增加1-3倍；又如多數(shù)蛋白在60℃以上開(kāi)始變性，熱變性通常是不可逆的，不利于物質(zhì)的穩(wěn)定存在。另外，適宜的溫度(如室溫)又是微生物污染的重要條件。而低溫卻可以抑制氧化、水解等化學(xué)反應(yīng)及微生物生長(zhǎng)，使微生物處于生命遲緩和隱蔽狀態(tài)。故大多數(shù)生化樣品選擇低溫保存，其穩(wěn)定性可大大增加。

通常蛋白質(zhì)短期在4℃中儲(chǔ)存穩(wěn)定，不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)應(yīng)儲(chǔ)存在-20℃，而極不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)存儲(chǔ)在-70℃。然而在冷凍過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量的小冰晶，形成更大的冰-水界面表面積，冰-水表面面積的增加與蛋白質(zhì)構(gòu)象的變化和蛋白質(zhì)聚集的增加有關(guān)，因此需要避免反復(fù)凍融。

凍干粉抗體，穩(wěn)定性高，可在-20℃、-80℃條件中長(zhǎng)時(shí)間保存（長(zhǎng)達(dá)數(shù)年），4℃環(huán)境也較為穩(wěn)定。權(quán)衡各種因素，凍干粉抗體一般保存在-20℃，取用方便，保存時(shí)間長(zhǎng)。粉末狀抗體溶解后即變成液體狀態(tài)抗體，保存條件發(fā)生變化。需要按照說(shuō)明書(shū)或者液體抗體保存方法（最好分裝）。

三、蛋白質(zhì)保存濃度

通常蛋白質(zhì)的濃度也是影響穩(wěn)定性重要因素，一般蛋白質(zhì)在高濃度(1 mg/ml或者更高)溶液中比較穩(wěn)定，不容易降解，因?yàn)橐簯B(tài)蛋白質(zhì)容易受水化作用的影響，保存時(shí)濃度不能太低，否則可能引起亞基蛋白和輔助因子解離，會(huì)導(dǎo)致結(jié)構(gòu)松散，穩(wěn)定性下降而易于失活。

因此部分抗體試劑中加入了牛血清白蛋白（BSA）作為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑來(lái)防止降解。加入BSA能夠抑制冷凍引起的蛋白質(zhì)去折疊，通過(guò)增加蛋白質(zhì)的起始濃度，能夠增強(qiáng)在凍融過(guò)程中蛋白質(zhì)制備物對(duì)損傷的耐受性。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)的起始濃度增高時(shí)，抗體變性的百分比也會(huì)下降。另一方面，加入的蛋白還能盡可能減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。

當(dāng)抗體稀釋至工作濃度后，應(yīng)當(dāng)及時(shí)使用，在4℃盡量不要超過(guò)1天。

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