液相雜交芯片與固相雜交芯片的原理及區別

 液相雜交芯片和固相雜交芯片是兩種不同的基因檢測技術，它們在原理、應用、技術優勢等方面存在一定的差異。以下是對這兩種芯片的詳細比較：

一、液相雜交芯片

1. 基本原理

     液相雜交芯片技術，在農業育種中常被稱為“液相芯片"或“靶向序列捕獲"，英文名稱為“Genotyping by target sequencing"。該技術最早由安捷倫公司推出，其工作原理基于目標探針與靶向序列互補結合的定點捕獲測序。具體來說，該技術利用生物素標記的探針在液態中與基因組目標區域雜交形成雙鏈，隨后通過鏈霉親和素包被的磁珠捕獲這些雙鏈，最后對捕獲的靶點序列進行洗脫、擴增和測序，以獲得目標SNP的基因型。

2. 技術特點

低成本：相比于全基因組重測序，液相芯片技術能夠顯著降低測序成本，因為它只需對感興趣的區域進行測序。

高通量：雖然液相芯片本身是一個捕獲試劑盒，但它與二代測序技術結合后，能夠實現高通量的基因型檢測。

靈活性：液相芯片技術可以根據實驗需求定制檢測位點，且定制完成后能靈活增加檢測位點。

3. 應用領域

     液相雜交芯片在多個領域有廣泛應用，包括農業育種、醫學研究、免疫學分析、核酸研究、酶學分析、受體和配體分析等。該技術不僅能用于臨床診斷，還能在科研中提供高效的數據支持。

二、固相雜交芯片

1. 基本原理

     固相雜交芯片技術是將待測的靶核苷酸鏈預先固定在固體支持物上（如載玻片、尼龍膜等），而標記的探針則游離在溶液中。通過雜交反應，使雜交分子留在支持物上，從而進行檢測。該技術基于堿基互補雜交特性，設計并固定與待測位點互補的寡核苷酸探針于固體芯片上，通過雜交反應捕獲待測位點后，對探針進行單堿基延伸及熒光染色，最后利用高分辨率儀器進行檢測。

2. 技術特點

高通量：固相芯片能夠同時對幾十萬乃至幾百萬量級的SNP位點進行基因分型，通量高、速度快、數據準確。

穩定性好：固相芯片技術具有出色的檢出穩定性，且芯片數據分析便捷。

定制靈活：固相芯片也能根據實驗需求定制檢測位點，且定制周期相對較短。

3. 應用領域

     固相雜交芯片技術在生命科學、醫學診斷、藥物研發等領域有廣泛應用。在農業育種中，它常被用于大規模的基因型檢測和分析。

三、液相雜交芯片與固相雜交芯片的比較

液相雜交芯片基于靶向序列捕獲技術，利用生物素標記的探針與基因組目標區域雜交形成雙鏈，然后通過鏈霉親和素包被的磁珠進行分子吸附，最終對捕獲的靶點序列進行測序?。這種技術不需要對全基因組進行測序，而是有針對性地捕獲特定區域的DNA片段，從而降低了測序成本并簡化了數據分析?。液相雜交芯片的靈敏度高，檢測范圍廣泛，最di檢測濃度可達0.1 pg/mL，適用于大量樣本的高通量檢測??？蓱糜谵r業育種、醫學研究等領域。

固相雜交芯片則基于熒光檢測技術，通常用于基因分型和SNP標記的檢測?。它的分離效率高，選擇性好，且不受試樣揮發性和熱穩定性的限制，但在準確性和靈活性方面不如液相雜交芯片??？蓱糜谏茖W、醫學診斷、藥物研發等領域。

綜上所述，液相雜交芯片在技術原理、應用范圍、靈敏度和準確性方面優于固相雜交芯片，尤其在高通量檢測和降低測序成本方面表現突出。

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