HGC-27細胞培養指南 | 實驗步驟與防污染技巧（新手必讀）

HGC-27細胞是一種來源于人胃癌患者轉移性淋巴結的低分化胃癌細胞系，具有較強的侵襲性和增殖能力，常用于研究胃癌的分子機制、藥物篩選以及侵襲與轉移特性分析。它在體外呈上皮樣貼壁生長，呈多角形或短梭形，以單層形式生長。能夠在免疫缺陷小鼠中形成移植瘤，是胃癌相關研究的重要模型。

一、實驗準備（關鍵物料清單）

? 細胞來源：建議從ATCC/中科院細胞庫獲取（批號可溯源）
? 培養基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1%雙抗（Gibco品牌優選）
? 儀器：37℃恒溫CO?培養箱（CO?濃度5%）、生物安全柜（潔凈度100級）

二、詳細培養步驟

1. 復蘇操作

快速解凍37℃水浴≤2分鐘離心去DMSO1000rpm×5min重懸接種初始密度2×10? cells/cm2

?? 防凍傷要點：解凍后立即轉移至預溫培養基

2. 傳代方法

• 消化控制：0.25%胰酶（含EDTA）作用2-3分鐘（鏡下觀察細胞變圓）

• 終止技巧：加入含血清培養基（體積≥3倍消化液）

• 分瓶比例：1:3至1:4（24-48小時可達80%融合度）

3. 凍存方案

• 凍存液配方：90% FBS + 10% DMSO（現用現配）

• 程序降溫：4℃ 30min → -20℃ 2h → 液氮長期保存

三、培養問題排查（附解決方案）

?? 注意事項（提升實驗成功率）

• 狀態監控：每日觀察細胞形態（貼壁率＜50%需排查）

• 傳代周期：不超過30代（建議定期STR鑒定）

• 污染預防：操作前紫外滅菌30min，試劑瓶酒精噴淋

  
  

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