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      當前位置:首頁技術文章Wako質譜級賴氨酰肽鏈內切酶概述

      Wako質譜級賴氨酰肽鏈內切酶概述

      更新時間:2026-03-04點擊次數:27

      Wako質譜級賴氨酰肽鏈內切酶Lysyl Endopeptidase®, MS Grade,貨號 125-05061)是蛋白質組學研究中用于質譜樣品前處理的一款核心工具酶。它的特點是特異性高、性能穩定,特別適合與胰蛋白酶聯用以提升蛋白鑒定覆蓋率

      一、 Wako的質譜級賴氨酰肽鏈內切酶核心信息一覽

      項目

      說明

      產品名稱

      質譜級賴氨酰肽鏈內切酶 (Lysyl Endopeptidase®, MS Grade)

      品牌/貨號

      FUJIFILM Wako / 125-05061 

      核心特性

      高特異性(僅切割賴氨酸C端)、高穩定性(耐受尿素及SDS)、低漏切率 

      產品規格

      20 μg × 5  (凍干粉,含Tris-HCl緩沖鹽

      應用場景

      蛋白質譜鑒定、蛋白測序、肽段圖譜分析、與胰蛋白酶聯合酶切 

      二、Wako的質譜級賴氨酰肽鏈內切酶產品特性與應用優勢

      這款酶之所以在質譜分析中表現出色,主要源于以下幾個關鍵技術優勢:

      1. ji致的切割特異性:它特異性水解賴氨酸(Lys)殘基C末端的肽鍵。與同時切割賴氨酸和精氨酸的胰蛋白酶相比,它的酶切產物通常是更長的肽段,這在某些蛋白測序中具有獨特-價值

      2. 與胰蛋白酶聯用,實現金標準"酶切方案:這是它最核心的應用場景。先使用Lys-C在含尿素的變性條件下進行第1步切割,稀釋后再用胰蛋白酶進行第二步切割。這種組合策略能顯著提高酶解效率,尤其是對膜蛋白等難溶蛋白,可大幅提升肽段鑒定數量和序列覆蓋率

       3. 出色的穩定性與兼容性:該酶活性不受4M尿素或0.1% SDS等常見變性劑的影響,這意味著它可以適應復雜的樣品處理條件。在pH 5.0-12.0范圍內穩定,zui適反應pH 9.0-9.5

      4. 顯著提升質譜數據質量:實驗數據表明,與單獨使用胰蛋白酶相比,Lys-C與胰蛋白酶聯用可以將漏切位點比例從8%降至3%,同時鑒定出的多肽數量從17個增加到22個,有效提高蛋白測序的覆蓋度

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      三、Wako的質譜級賴氨酰肽鏈內切酶使用要點

      溶解:使用前,將一支(20 µg)凍干粉溶解于 1 mL 2 mmol/L Tris-HCl 緩沖液 (pH 8) 中,輕輕混勻即可

      儲存:必須在 -20°C 條件下,避光保存,以保持其活性穩定

      參考用法(膠內酶切):凝膠片段經脫色、還原烷基化、脫水干燥后,用含Lys-C的緩沖液(如50 mmol/L Tris-HCl, pH 8.5)在冰上充分溶脹,隨后在 37°C 下酶切過夜,最后抽提肽段進行質譜分析

      四、Wako的質譜級賴氨酰肽鏈內切酶注意事項

      該產品僅用于研究目的,不可用于人體或臨床診斷

      其來源菌株水解無色桿菌根據新的分類學被鑒定為產酶溶桿菌,這并不影響產品性能

      使用時需注意其抑制劑,如DFPPMSFTLCK等,避免在溶液中加入這些物質

      你是計劃用它來做膠內酶切還是溶液內酶切?不同的實驗流程在步驟上會有些差異,可以告訴我你的具體應用,技術人員可以幫你整理更詳細的操作步驟。

      Wako代理——天津益元利康生物科技有限公司,現貨,歡迎咨詢。

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      天津益元利康生物科技有限公司

      益元利康有限公司是一家專注于生命科學實驗室快速消耗品為主營方向的生命科技企業,提供完整的產品和服務體系,為廣大的科研用戶提供實驗室一站式服務。益元利康已成為多家生物品牌的代理商,如ALZETMedKooEZBWaKoZymo researchQiagen等,為用戶提供完善的產品、專業的咨詢,助力推動中國生命科學研究快速發展。

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