常用的基因沉默技術(shù)有哪些？

2024-02-21 基因沉默主要指基因表達(dá)的抑制和沉默現(xiàn)象。在生物體內(nèi)，基因的表達(dá)受到嚴(yán)格調(diào)控，而基因沉默就是一種重要的基因表達(dá)調(diào)控方式。根據(jù)作用方式的不同，基因沉默可分為自然發(fā)生的基因沉默和人為操作的基因沉默。自然發(fā)生的基因沉默可通過多種因素實(shí)現(xiàn)，如DNA甲基化、異染色質(zhì)形成、轉(zhuǎn)錄后基因沉默（RNAi）等。而人為操作的基因沉默則可以通過基因敲除、轉(zhuǎn)錄因子抑制、表觀遺傳修飾等方法實(shí)現(xiàn)。那么，常用的基因沉默技術(shù)有哪些？一起來學(xué)習(xí)一下吧！RNA干擾（RNAi）：RNAi技術(shù)利用雙鏈RNA（dsRNA...

培養(yǎng)基中各類添加成分所具有的作用是什么？

2024-02-21 細(xì)胞培養(yǎng)基是供給細(xì)胞營養(yǎng)、維持細(xì)胞生長和增殖的多種營養(yǎng)物質(zhì)的混合物，基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì)。人工合成培養(yǎng)基使用時(shí)還需添加一定量的血清使細(xì)胞生長和繁殖。培養(yǎng)基中各類添加成分所具有的作用是什么？一起學(xué)習(xí)下吧！L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)液體環(huán)境中所必需的一種營養(yǎng)成分，是細(xì)胞生長的必須氨基酸，為培養(yǎng)的細(xì)胞提供重要的能量來源。脫掉氨基后，...

PVDF膜和NC膜的區(qū)別有哪些？

2024-02-20 WB實(shí)驗(yàn)中常用的轉(zhuǎn)印膜有兩種：PVDF膜和NC膜。那么PVDF膜和NC膜的區(qū)別有哪些？一起來學(xué)習(xí)一下吧！物理性能：PVDF膜具有較高的拉伸強(qiáng)度和斷裂伸長率，而NC膜的拉伸強(qiáng)度和斷裂伸長率較低。PVDF膜較為柔軟，易于切割和折疊，而NC膜較為脆性，不易加工。化學(xué)穩(wěn)定性：PVDF膜具有較好的耐化學(xué)性，對(duì)酸堿性物質(zhì)和一些溶劑具有較好的穩(wěn)定性，而NC素膜則對(duì)酸堿性物質(zhì)和有機(jī)溶劑比較敏感。PVDF膜具有較好的耐候性，能夠在室外環(huán)境中長時(shí)間保持穩(wěn)定性，而NC素膜在陽光和濕度條件下容易分解...

你了解PVDF膜的使用技巧嗎？

2024-02-20 PVDF超濾膜是一種以聚偏氟乙烯（PVDF）為主要原料制成的超濾膜，具有優(yōu)異的耐化學(xué)性、耐高溫性、耐候性和機(jī)械強(qiáng)度，普遍應(yīng)用于水處理、食品飲料、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域的分離、濃縮和純化等工藝。那么，你了解PVDF膜的使用技巧嗎？一起來學(xué)習(xí)一下吧！PVDF膜使用時(shí)要用甲醇浸泡？PVDF本質(zhì)是一種疏水性的聚合物，在水溶液中不會(huì)浸濕。為了在水性緩沖液使用PVDF膜，首先必須將其浸泡在50%醇溶液中。甲醇、乙醇和異丙醇都適合浸泡這種膜。之后必須用水反復(fù)沖洗以去除醇類，經(jīng)預(yù)處理的膜現(xiàn)在可以直接...

細(xì)胞鋪板不勻的解決方法有哪些？

2024-02-19 細(xì)胞接種鋪板作為體外藥理實(shí)驗(yàn)中最基本的技能，是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵因素。鋪板不勻又是科研實(shí)驗(yàn)中通往成功道路的一大障礙，細(xì)胞聚集導(dǎo)致的接觸抑制現(xiàn)象使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可信度大打折扣。本片文章將會(huì)介紹細(xì)胞鋪板不勻的解決方法有哪些？一起來跟小編漲知識(shí)吧！對(duì)于96孔板，每孔通常加入100μL細(xì)胞懸液。加樣方式為傾斜槍頭，從孔的左邊靠近底部緩慢加入（加樣過快同樣容易導(dǎo)致細(xì)胞聚集）。筆者建議，每加完半拉板子時(shí)，把細(xì)胞重新混勻，繼續(xù)加樣。加樣結(jié)束后，鏡下觀察如有局部不均勻現(xiàn)象，可以采取敲擊法，具體操作如...

WB實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)不同情況的條帶問題怎么解決呢？

2024-02-19 Westernblot是一個(gè)非常基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)，但是著實(shí)讓我們頭疼，即使是老手也擋不住WB實(shí)驗(yàn)的千錘百煉，懂得都懂，當(dāng)WB實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)不同情況的條帶問題怎么解決呢？我們一起來探討一下，希望對(duì)正在做WB實(shí)驗(yàn)的小伙伴提供一個(gè)避雷參考！情況一：條帶呈笑臉狀1.遷移過快或電泳溫度過高：降低電壓或低溫電泳。2.配膠問題，凝膠不均勻冷卻，中間冷卻不好遷移過快：重新配膠，電泳槽老化換新。情況二：條帶呈皺眉狀配膠問題，可能是裝置不合適特別可能是凝膠和玻璃擋板底部有氣泡或者凝膠兩邊聚合不wan全。情...

流式細(xì)胞分選抗體該如何存儲(chǔ)？

2024-02-15 流式細(xì)胞分選抗體的選擇和實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化對(duì)于獲得準(zhǔn)確而可靠的結(jié)果非常重要。抗體的結(jié)合親和力、選擇性以及背景信號(hào)的影響等因素都需要進(jìn)行仔細(xì)考慮和驗(yàn)證。流式細(xì)胞分選抗體的方法：1.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，選擇合適的流式細(xì)胞儀和抗體。抗體可以是標(biāo)記有熒光染料、生物素-鏈霉親和素體系等等。2.準(zhǔn)備待測(cè)細(xì)胞懸液，確保細(xì)胞濃度適宜，并進(jìn)行單細(xì)胞懸浮。3.將細(xì)胞懸液與適當(dāng)稀釋的抗體共孵育，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間內(nèi)進(jìn)行反應(yīng)，通常為30分鐘至1小時(shí)。4.洗滌細(xì)胞，以去除未結(jié)合的抗體。5.使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞分選，...

怎么解凍胎牛血清呢？

2024-02-06 胎牛血清是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基和生化實(shí)驗(yàn)中的重要試劑，然而在使用前需要進(jìn)行解凍。正確的解凍方法對(duì)于保持胎牛血清的活性和質(zhì)量至關(guān)重要。那么，我們應(yīng)該怎么解凍胎牛血清呢？下面將介紹一種常用的解凍方法。首先，選擇適宜的解凍溫度。通常情況下，胎牛血清應(yīng)該在2-8攝氏度的冰箱中解凍，避免過快或過慢的解凍。迅速解凍可能導(dǎo)致血清中蛋白質(zhì)的不均勻沉淀，而緩慢解凍則可能引發(fā)蛋白質(zhì)的降解。接著，將儲(chǔ)存胎牛血清的凍存管或瓶子取出，并放置在室溫下靜置片刻。如此一來，能夠使溫度逐漸上升，減少溫度梯度對(duì)...