-
如何選擇熒光定量PCR耗材
2023-12-04
熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)已成為當(dāng)前病毒核酸檢測(cè)的主要手段,除了高質(zhì)量的檢測(cè)試劑、參數(shù)穩(wěn)定的熒光定量PCR儀外,所選用的檢測(cè)耗材的質(zhì)量,也會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性及靈敏度產(chǎn)生很大的影響。那么如何選擇熒光定量PCR耗材呢?讓我們一起來(lái)看看吧!一、高純度1.高品質(zhì)、高純度、高透明聚丙烯PP。2.潔凈空間生產(chǎn)加工。二、高熱傳遞性1.極薄的壁厚優(yōu)化熱傳遞減少循環(huán)時(shí)間。三、高反射熒光信號(hào)1.qPCR更推薦使用優(yōu)質(zhì)的白色PCR耗材。2.管蓋:高透光性,蓋子的光通過(guò)率直接關(guān)系著儀器的信號(hào)采集,選擇...
-
如何分辨細(xì)胞污染類(lèi)型?
2023-11-30
細(xì)胞培養(yǎng)物污染往往是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室中最常見(jiàn)的問(wèn)題,有時(shí)會(huì)造成非常嚴(yán)重的后果。細(xì)胞培養(yǎng)污染物可分為兩大類(lèi),一類(lèi)是化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì),包括內(nèi)毒素、增塑劑和洗滌劑,另一類(lèi)是生物污染物,如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒和支原體,以及其他細(xì)胞系的交叉污染。那么我們?cè)撊绾畏直娓鞣N細(xì)胞污染呢?讓我們一起來(lái)看看吧!一、細(xì)菌污染肉眼觀察特點(diǎn):細(xì)菌污染時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)基可能在幾個(gè)小時(shí)呈現(xiàn)混濁,爆發(fā)很快。有時(shí)稍加震蕩,便會(huì)有很多混濁物漂起。在低倍顯微鏡下,細(xì)菌以細(xì)小顆粒的形式出現(xiàn)在細(xì)胞之間,...
-
蛋白質(zhì)純化的原理是什么?
2023-11-30
蛋白純化是指通過(guò)基因工程技術(shù)將編碼蛋白的核酸序列導(dǎo)入到宿主細(xì)胞,使其大量表達(dá),再使用適當(dāng)?shù)募兓椒▽⑵湓隗w外純化出來(lái),從而獲得高純度、活性和產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)可以分為原核表達(dá)系統(tǒng)和真核表達(dá)系統(tǒng)兩大類(lèi)。那么你知道蛋白質(zhì)純化的原理是什么嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!一、乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控在沒(méi)有乳糖存在時(shí),lac操縱子處于阻遏狀態(tài),此時(shí),I序列表達(dá)Lac阻遏蛋白與O序列結(jié)合,阻礙RNA聚合酶與P序列結(jié)合,抑制轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)。當(dāng)有乳糖存在時(shí),乳糖進(jìn)入細(xì)胞,經(jīng)β-半乳糖苷酶催化,轉(zhuǎn)變?yōu)楫?..
-
瓊脂糖凝膠電泳的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些?
2023-11-29
瓊脂糖凝膠電泳是根據(jù)核酸(DNA或RNA)分子大小來(lái)分離和識(shí)別物質(zhì)的技術(shù)。那么你知道瓊脂糖凝膠電泳的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!一、同樣大小的DNA一起跑電泳條帶不一樣大DNA條帶不一樣大,本質(zhì)上是DNA在凝膠中的遷移率不一樣,有的跑得快,有的慢,通常情況同樣大小的DNA,遷移率是一樣的,條帶位置也會(huì)一樣。但遷移率也受很多因素影響,例如DNA的構(gòu)象。例如環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)的DNA,和同等大小的線(xiàn)性DNA(例如單位點(diǎn)酶切后的質(zhì)粒),前者的遷移率要高,表現(xiàn)出來(lái)就是看上去超螺...
-
細(xì)胞計(jì)數(shù)通用步驟有什么?有何注意事項(xiàng)?
2023-11-29
細(xì)胞計(jì)數(shù)是指對(duì)細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行定量測(cè)定的方法。在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定細(xì)胞培養(yǎng)的密度和數(shù)量,可以掌握細(xì)胞生長(zhǎng)的情況。同時(shí),細(xì)胞計(jì)數(shù)也是衡量不同實(shí)驗(yàn)條件下細(xì)胞生長(zhǎng)情況的重要指標(biāo)之一。那么你知道細(xì)胞計(jì)數(shù)通用步驟有什么嗎?有何注意事項(xiàng)呢?讓我們一起來(lái)看看吧!一、細(xì)胞計(jì)數(shù)的通用方法1.以貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞為例,消化后的細(xì)胞充分重懸吹散,取一部分轉(zhuǎn)移至干凈的EP管內(nèi),例如1mL;2.使用酒精棉球輕輕擦拭計(jì)數(shù)板表面和蓋玻片,把后者的邊緣微微濕潤(rùn),然后小心蓋在計(jì)數(shù)板的正中間,邊緣要能覆...
-
你知道什么是緩沖溶液?jiǎn)幔?/a>
2023-11-28
你知道什么是緩沖溶液?jiǎn)幔孔屛覀円黄饋?lái)看看吧!緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的重要溶液,對(duì)穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。最常見(jiàn)的幾種緩沖體系有磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷(簡(jiǎn)稱(chēng)Tris)-HCl緩沖溶液、羥yi基哌qin乙磺酸(供注射用)(簡(jiǎn)稱(chēng)HEPES)緩沖溶液。對(duì)于絕大多數(shù)生物制劑(如疫苗、抗體、ADC偶聯(lián)藥物、脂質(zhì)體等)而言,實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)際生產(chǎn)以及生物體內(nèi)的生化反應(yīng)等都需要在特定的pH值范圍內(nèi)才能正常有效地進(jìn)行,從而得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)論或發(fā)揮最...
-
如何選擇緩沖溶液?
2023-11-28
三羥甲基氨基甲烷(Tris)是一種應(yīng)用非常廣泛的有機(jī)試劑。它及其衍生物被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖液的制備,可用于制作藥物、有機(jī)合成、生物緩沖劑等。其中在生化實(shí)驗(yàn)中,許多蛋白質(zhì)及核酸相關(guān)的實(shí)驗(yàn)都需要用Tris作為生物緩沖劑。那么你知道該如何選擇緩沖溶液?jiǎn)幔孔屛覀円黄饋?lái)看看吧!TBS即Tris緩沖鹽水,是Tris-HCl緩沖鹽溶液,為等滲鹽溶液加Tris-HCl緩沖液。因?yàn)門(mén)ris堿的堿性較強(qiáng),所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩...
-
細(xì)胞消化的方法有哪些?
2023-11-27
細(xì)胞消化的方法有哪些?我們的細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)大部分會(huì)以貼壁的形式生長(zhǎng),它們?cè)跈C(jī)體內(nèi)時(shí),也是與其他細(xì)胞或者細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合的。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中使用的wan全培養(yǎng)基中的血清,含有許多帶陽(yáng)性電荷的促細(xì)胞附著因子(層黏連蛋白Laminine、纖維連接蛋白Fibronectin等胞外基質(zhì)),能幫助細(xì)胞附著于帶陰性電荷的底物上,并形成連接、貼壁伸展。使細(xì)胞解除這種附著,就是細(xì)胞消化。那么你知道細(xì)胞消化的方法有哪些嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!一、機(jī)械消化法直接用培養(yǎng)基吹打或使用細(xì)胞刮刀,通過(guò)外力使細(xì)胞...