免疫熒光（IF）實驗常見問題有哪些？解決方案有什么？

2023-09-01 免疫熒光技術是根據(jù)抗原抗體反應的原理，先將已知的抗原或抗體標記上熒光素，制成熒光抗體，再用這種熒光抗體（或抗原）作為探針檢測組織或細胞內(nèi)的相應抗原（或抗體）。那么你知道在免疫熒光（IF）實驗中會遇到那些問題以及這些問題的解決方法嗎？讓我們一起來看看吧！問題一：目標蛋白熒光很弱，導致組間差異不顯著，導致假陰性結果解決方案：出現(xiàn)這種情況后，首先檢查抗體是否正確，是否適用于預處理的組織。有些抗體只適用于冰凍切片，但如果應用于石蠟切片，則會出現(xiàn)弱標記或無標記現(xiàn)象。然后通過文獻了解目的...

如何選擇熒光蛋白？

2023-08-31 熒光標記在生物學眾多的研究領域中有著十分廣泛的應用，已經(jīng)成為研究體內(nèi)或細胞成像及生物細胞功能的重要工具。熒光標記方式一般有兩種，一種是細胞表達的熒光蛋白，另外一種是化學合成的熒光分子，此外，螢光素酶也是細胞標記的常用方法。每一種熒光分子都有其獨te的激發(fā)波長和發(fā)射波長。螢光素酶不同于熒光分子，其發(fā)光機制是利用酶與底物的反應，催化發(fā)出的化學發(fā)光，其發(fā)光并不需要激發(fā)光的參與，常用于體內(nèi)成像及螢光素酶報告基因的定量實驗。熒光蛋白如何選擇呢？讓我們一起來看看吧！一、激發(fā)波長/發(fā)射波長...

DNA提取試劑盒，應該如何選？

2023-08-30 實驗室工作中，經(jīng)常會需要用到純化的DNA，這時我們通常需要使用一個商業(yè)的DNA提取試劑盒對目的DNA進行分離純化。市面上有很多類型的提取試劑盒，當使用不太熟悉的樣本類型時，選擇合適的盒子是尤為關鍵的，應該如何選擇呢？讓我們一起來看看吧！一、試劑盒組分目前大多數(shù)DNA提取試劑盒遵循相同的基本步驟:裂解，柱純化，洗滌雜質(zhì)，柱洗脫。然而，不同的盒子在完成每個步驟的方式上有很大的不同。二、使用的樣本類型不同的DNA來源有不同的試劑盒，從實驗室培養(yǎng)的細胞，到臨床樣本，土壤樣本，甚至指紋...

提取DNA方法的優(yōu)缺點，你知道嗎？

2023-08-30 目前比較常用的提取DNA的方法有：苯酚氯仿抽提法、離心柱法和磁珠法，提取DNA的這些方法有哪些優(yōu)缺點呢？你都知道嗎？讓小編帶你來看看吧！一、苯酚氯仿抽提法苯酚氯仿提取DNA是利用酚是蛋白質(zhì)的變性劑，反復抽提，使蛋白質(zhì)變性，SDS(十二烷基磺酸鈉)將細胞膜裂解，在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白質(zhì)或多肽或小肽分子，變性降解核蛋白，使DNA從核蛋白中游離出來。而DNA易溶于水，卻不溶于有機溶劑。蛋白質(zhì)分子表面帶有親水基團，也容易進行水合作用，并在表面形成一層水化層，使蛋白質(zhì)分子...

抗體如何保存合適？

2023-08-28 抗體保存好，實驗失敗少。那抗體如何保存合適？讓我們一起來看看吧！一、保存溫度和條件很多抗體的最佳保存條件是分裝成小包裝凍存于-20°C或-80°C。分裝能使凍融引起的損失減到最小，同時可避免多次在一個管內(nèi)取樣而由槍頭引入的污染。分裝凍存的抗體，融解一次后剩余抗體應保存于4°C。收到抗體后，應10,000xg離心20秒，使管口螺紋內(nèi)的抗體溶液全部離心至管底，用低蛋白吸附性的微量離心管分裝。分裝量的多少取決于每次試驗的使用量。分裝量不能少于10μl；分裝量越少，由于蒸發(fā)和吸附于管...

常用的轉(zhuǎn)染方法有哪些不同？

2023-08-28 轉(zhuǎn)染方法很多，常見的有：DEAE－葡聚糖法、磷酸鈣法、陽離子脂質(zhì)體法、陽離子聚合物、逆轉(zhuǎn)錄病毒(RNA）、病毒介導法、Biolistic顆粒傳遞法（基因槍粒子轟擊法）、顯微注射法、電穿孔法等。常用的轉(zhuǎn)染方法有哪些不同？讓我們一起來看看吧！一、DEAE－葡聚糖法原理：帶正電的DEAE-葡聚糖與核酸帶負電的磷酸骨架相互作用形成的復合物被細胞內(nèi)吞。主要應用：瞬時轉(zhuǎn)染特點：相對簡便、重復比磷酸鈣好,但對細胞有一定的毒副作用,轉(zhuǎn)染時需除血清且一般只用于BSC-1,CV-1,COS細胞系...

熱銷產(chǎn)品：USA Scientific 0.2ml PCR八連排(1402-4700)

2023-08-25 USAScientific生產(chǎn)和分銷高質(zhì)量的實驗室塑料、設備和配件。自1982年以來，USAScientific一直是值得信賴的實驗室合作伙伴。USAScientific大多數(shù)產(chǎn)品在美國制造。例如，TipOne®、TempAssure®PCR管和TempPlate®PCR板、所有密封膜和箔、塑料儲存盒和支架、血清學移液管、大多數(shù)管和設備等。產(chǎn)品簡介：USAScientific0.2mlPCR八連排(1402-4700)無彎曲帶經(jīng)過加固，可在搬運時抵抗彎...

對Elastin彈性蛋白/膠原酶你了解嗎？

2023-08-25 彈性蛋白是一種由氨基酸組成的蛋白質(zhì)，具有很高的可延展性和回彈性。它主要存在于結締組織中，如皮膚、血管和肺泡等。彈性蛋白能夠使這些組織具有彈性和柔韌性，從而能夠承受外部壓力和拉力。這種能力使它們在日常活動和運動中起到關鍵的支持和保護作用。膠原酶是一種酶類，可以降解膠原蛋白和彈性蛋白。膠原蛋白是另一種主要的結構蛋白，存在于人體的各種組織中。膠原酶通過分解膠原蛋白和彈性蛋白的連接，調(diào)節(jié)這些蛋白質(zhì)的含量和分布。這種降解作用對組織的重構和修復至關重要，因為它能夠清除老化和受損的蛋白質(zhì)，...