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提高細胞轉染效率,這些關鍵點你知道嗎?
2023-08-23
細胞轉染是現代生物學研究中常用的實驗技術之一,它使研究者能夠引入外源DNA、RNA或蛋白質等分子到目標細胞中,以研究細胞的功能和相互作用。然而,進行細胞轉染實驗時需要注意一些關鍵細節,以確保實驗的準確性、可靠性和可重復性。提高細胞轉染效率,這些關鍵點你知道嗎?一、合適的細胞類型和培養條件不同的細胞類型對轉染方法和試劑的敏感性有所差異,因此在進行轉染實驗之前,要仔細選擇合適的細胞類型,并確保其在適當的培養條件下生長良好。了解細胞的特性和要求,包括細胞密度、培養基成分、培養時間等...
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什么是熒光原位雜交?
2023-08-23
熒光原位雜交(FluorescenceinsituhybridizationFISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、病毒感染分析、人類產前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究待許多領域。FISH的基本原理是用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核...
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蛋白質定量有哪些方法?
2023-08-22
蛋白定量是蛋白分離和分析前必須的一個重要步驟,蛋白色譜分離、蛋白質電泳分析、蛋白質免疫分離和分析、細胞裂解釋放的總蛋白定量、蛋白分子的標記、蛋白結構分析等,都需要可靠的定量分析作為基礎。蛋白定量分析應用的領域包括生物科學,食品檢驗,臨床檢驗等等。蛋白質定量有哪些方法?讓我們一起來看看吧!一、比色法蛋白定量常使用的方法是比色法,通常用于總蛋白的定量分析。根據蛋白和比色試劑的結合,可以將比色法分為:蛋白-染料結合法和蛋白-銅螯合化學試劑法。前者對應的典型蛋白定量比色法是考馬斯亮藍...
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WB實驗中條帶不跑歪的秘訣
2023-08-21
在做Westernblot實驗時,你一定會遇到各式各樣的條帶,最常見的就是條帶跑歪了,如凹型條帶、凸型條帶、斜條帶、條帶拖尾等。如何更好的做好WB實驗,讓我們一起來看看WB實驗中條帶不跑歪的秘訣吧!一、凹凸條帶的原因和解決辦法可能原因:可能是由于膠未配好(凝膠未能wan全聚合,膠中有顆?;驓馀?,凝膠未冷卻好,),也可能是電壓過高。解決方法:正確添加質量合格且未過期的AP及TEMED;過濾配膠的試劑保證配膠過程中膠內無氣泡;凝膠冷卻好后再上樣;降低電壓。二、條帶出現黑點或黑斑的...
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Q-pcr 和 RT-pcr 有啥區別?
2023-08-21
Q-PCR和RT-PCR都是分子生物學中常用的技術,用于檢測和定量特定的核酸序列。Q-pcr和RT-pcr有啥區別?它們的原理和應用類型相同嗎?今天讓我們一起來了解一下吧!一、Q-pcr和RT-pcr原理上的不同Q-PCR也是基于PCR的技術,但它引入了熒光探針或熒光染料來實時監測PCR反應的進程。熒光信號的強度與目標序列的數量成正比,因此可以定量地測量起始樣品中的目標核酸數量。RT-PCR結合了逆轉錄(ReverseTranscription)和聚合酶鏈式反應(PCR)的過...
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PolyPlus轉染試劑jetPRIME®產品問題匯總
2023-08-18
問題一:化合物Q:INTERFERin®是什么類型的化合物?A:INTERFERin®是新一代的非脂質體陽離子兩性分子轉染試劑,專為培養的哺乳動物細胞的siRNA轉染而開發。使用INTERFERin®,加入1nM的siRNA就能達到90%以上的沉默效率。問題二:細胞Q:INTERFERin®已成功轉染的細胞系有哪些?A:INTERFERin®已被成功用于多種貼壁細胞和非貼壁細胞系,例如HeLa,HEK-293,A549MDA-MB-23...
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CRISPR Cas9酶是一種基因編輯工具
2023-08-18
CRISPRCas9酶是一種基因編輯工具,用于修改生物體的基因組。CRISPR(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)是一種存在于細菌和古細菌中的一類DNA序列,而Cas9(CRISPR-associatedprotein9)是CRISPR系統中的一種酶。從細菌中發現的一種天然的免疫系統,用于抵御病毒入侵。它通過記錄病毒的DNA片段,并將其整合到自身的基因組中,形成CRISPR序列。當同一病毒再次入侵時,CR...
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原代細胞如何獲?。?/a>
2023-08-17
原代細胞(primarycell):是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞,稱為原代細胞。一般認為,培養的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞的獲取難度大、需要考慮的問題多,原代細胞如何獲取?原代細胞的獲取,就是從活體上將組織分解成單個細胞再進行培養的過程,且整個過程要求無菌操作。具體要考慮的問題有:組織分解的方式,培養的時間,換液時間,細胞狀態判斷和凍存。一、...