離心柱法提取DNA步驟

2024-11-13 常見核酸提取純化方法苯酚氯仿抽提法、磁珠法核酸分離技術、離心柱純化法等，今天我們來看下離心柱法的實驗步驟和優缺點吧~一、離心柱法提取DNA步驟離心柱法提取DNA步驟一將組織或細胞懸液加入裂解緩沖液，渦旋混勻。裂解緩沖液中含有變性劑（如胍異硫氰酸鹽），可以有效地裂解細胞和組織，破壞細胞膜和細胞核膜，同時使核酸與蛋白質分離。離心柱法提取DNA步驟二將裂解液轉移到DNASpinColumn中，離心收集流穿液。這個步驟涉及到將裂解液通過一個特殊的膜過濾，該膜具有特定的孔徑，允許小分子...

Alzet滲透泵濃度你會計算嗎？

2024-11-12 藥物濃度的調配需根據每日用藥量和緩釋泵的輸送速率兩項參數來計算，每日用藥量可通過查閱專業文獻獲取。此外，每支緩釋泵的輸送速率信息會附在包裝盒上，應根據包裝上的速率進行配藥。濃度計算舉例：2001滲透泵，給藥：抗利尿激素(ADH)，1.查閱文獻發現，大鼠正常的ADH分泌量為30ng/天/只，或1.25ng/小時/只。然后，計算出完成1.25ng/小時所需輸注量所需的ADH濃度：ko=Q?Cd其中ko(µg/hr)是質量輸送速率，Cd(µg/µ...

如何對pcr結果進行分析?

2024-11-12 一、PCR結果分析的基本步驟：?1.基線設置?：實時PCR反應的基線是指在PCR的初始循環期間的信號水平，通常是3至15個循環之間，此時熒光信號幾乎沒有變化，可以認為是背景或反應的噪音。2.?閾值設定?：?qPCR的閾值代表的是明顯超出基線的擴增信號水平，用以區分明確的擴增信號和背景。通常qPCR儀器自帶軟件會自動將閾值設置為基線熒光值標準偏差的10倍。3.?CT值計算?：Ct是指熒光信號超過閾值時對應的循環數，Ct值與目的基因的起始量成反比，可用于計算DNA初始拷貝數。4....

DMEM培養基變色原因

2024-11-12 DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)培養基廣泛應用于細胞培養。一般情況下DMEM培養基呈鮮紅色，當細胞狀態、培養條件以及培養基成分發生變化，培養基的顏色也會發生變化。以下是DMEM培養基變色的常見原因：1.pH值變化DMEM培養基中含有酚紅，它是一種pH指示劑，能夠根據培養基的pH值變化而改變顏色。在pH值低于6.8時培養基呈黃色，pH在7.4時為紅色，pH高于8.2時則呈紫色。2.細胞代謝活動細胞在代謝過程中，會消耗培養基中的糖分并產生乳酸...

細胞漂浮也有可能是你操作不當！

2024-11-11 細胞如若在生長過程中遇到漂浮困境，你有沒有想過會是操作不當？！接下來，跟隨康康一起，探討這個非微生物原因導致的細胞培養問題，并找到讓它正常發展的解決方案。復蘇后細胞漂浮原因一：細胞本身貼壁能力較弱比如細胞轉染的明星細胞293T，它生長較快，但貼壁能力弱，容易出現明顯的成片脫落現象。293細胞∝解決辦法：提前使用明膠包被板子，增強吸附性。另外，還建議使用TC處理（tissueculturetreated）的培養瓶/皿促進細胞貼壁附著。復蘇后細胞漂浮原因二：培養基選擇錯誤比如29...

簡石生物瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒TD407操作步驟

2024-11-08 簡石瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒TD407代理——天津益元利康生物科技有限公司。一、產品優點：1.從瓊脂糖凝膠中快速（15分鐘）高產量地回收超純的DNA；2.特制的微量柱設計使得DNA可以在高濃度下洗脫到最小體積（≥10µl）；3.洗脫的DNA非常適合用于DNA連接、測序、標記、PCR等應用。二、操作使用：（以下離心操作步驟的離心力均在10,000-16,000xg之間進行）簡石DNA回收試劑盒操作步驟一：使用刀片或手術刀把DNA片段從瓊脂糖凝膠上切除下來并且移置到...

六孔板總是鋪不均勻怎么辦呢？

2024-11-08 細胞鋪板不均會影響后續的干預效果和實驗檢測一致性和可信度。而細胞鋪板不均勻又是大部分小伙伴們都會遇到的問題，那這個問題該怎么解決呢？下面就結合相關資料以及個人經驗跟大家簡單分享一下孔板鋪板不均勻的可能原因以及可供參考的解決方法。六孔板鋪不均勻原因一：板子選擇問題板材質量不佳，導致鋪板不均勻。一些廉價的孔板可能存在制造本身上的不均勻，從而導致細胞分布不均。這是因為細胞傾向于在板孔內部的某些特定區域黏附，這些區域通常存在細微的結構或化學性質的不一致。解決方法：更換表面平整度高的高...

Alzet滲透泵工作原理及優點

2024-11-07 一、Alzet滲透泵工作原理：滲透壓泵可被埋植在實驗動物的皮下或者腹腔，滲透層與泵體埋植組織之間高滲透壓導致組織內水分通過泵體外層的剛性半透膜進入滲透層，從而擠壓由柔韌的非滲透性膜組成的藥池，使藥池內的試劑以預定的速度釋放。滲透壓泵屬于控釋釋放型給藥系統，利用滲透壓原理制成，可以實現藥物的恒速釋放，受生理因素的影響較小，是目前應用最多的控釋制劑。二、Alzet滲透泵優點：1.安全：無菌包裝、醫療級、創傷小、無異物排斥反應、可植入式2.多樣：動物：如小鼠、大鼠等，已驗證29種動...