PEG在核酸提取中的具體應用

2024-10-21 一、PEG是什么？PEG，聚乙二醇是一種高分子聚合物，無刺激性，味微苦，具有良好的水溶性，并與許多有機物組分有良好的相溶性。具有優良的潤滑性、保濕性、分散性、粘接性，可作為抗靜電劑及柔軟劑等使用，在化妝品、制藥、化纖、橡膠、塑料、造紙、油漆、電鍍、農藥、金屬加工及食品加工等行業中均有極為廣泛的應用。其分子式為HO(CH2CH2O)nH，其中n代表聚合度，決定了PEG的分子量。PEG具有良好的水溶性、無毒性、生物相容性和化學穩定性，這些特性使得PEG在生物醫學領域得到了廣泛應用...

qPCR的CT值為何定在15-35之間？

2024-10-17 一、擴增曲線擴增曲線是描述PCR動態進程的曲線，擴增曲線一般以循環數(Cyclenumber)為橫坐標,熒光強度(Fluorescenceintensity)或信號量(Signalamount)為縱坐標。典型的擴增曲線可以分成四個時期：基線期、指數期、線性期和平臺期。基線期：擴增曲線的水平部分，通常在PCR反應的前幾個循環（3-15個循環）內。此階段擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物生成量的變化。儀器軟件會基于這階段的熒光信號計算出基線范圍。指數期：PCR擴增的...

同型對照抗體是什么？如何使用？

2024-10-17 一、什么是同型對照抗體？同型對照抗體是一種與檢測抗體（一抗）相同種屬、相同種型（和亞類）、具有相同標記物的但對目標抗原無特異性識別能力的一抗。檢測抗體和同型對照抗體唯1的區別在于對待測樣本中目標抗原的特異性識別能力。檢測抗體能在代測樣本中特異性識別并結合目標抗原，而同型對照抗體不會特異性結合任何存在待測樣本中的抗原，其他屬性二者是完權一致的。二、為什么需要同型對照抗體？在流式細胞術（FC）和免疫組織化學（IHC）等實驗中，有很高的背景染色風險，我們會發現抗體與細胞的結合，可以...

RAW 264.7細胞傳代和凍存

2024-10-16 一、傳代培養傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養的過程。對單層培養而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。傳代培養中的細胞傳代培養（subculture），當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面也會因營養物不足和代謝物積累而不利于生長或發生中毒。二、RAW264.7細胞傳代步驟在進行RAW264.7細胞傳代時，首先需要將舊培養基棄去，并...

RAW 264.7細胞復蘇

2024-10-16 要復蘇RAW264.7巨噬細胞，首先需要將含有1mL細胞懸液的凍存管從液氮中取出并快速解凍于37℃水浴中，然后將其轉移到1mL新鮮培養基的無菌管中，并ce底混合均勻。接下來，使用1000rpm的離心速度離心5分鐘，將上清液倒掉，隨后再加入1mL培養基并充分重懸細胞。將懸液加入含有適量培養基的培養皿或瓶中（10ml/10cm皿），并將其放置在培養箱中過夜培養（37℃，5%CO2）。第二天檢查細胞的生長狀態和密度，以確定是否需要進行傳代操作。通過這些步驟，可以有效地復蘇RAW26...

PCR-SBT基本原理

2024-10-15 1.PCR擴增PCR-SBT技術首先是對待測DNA進行PCR擴增，以擴增出分型區域。PCR，即聚合酶鏈反應，是一種在體外快速擴增特定DNA片段的方法。在PCR過程中，需要設計特定的引物，它們能夠與待擴增的DNA片段兩端互補結合。然后，在DNA聚合酶的作用下，以dNTP為原料，按照堿基互補配對的原則，合成新的DNA鏈。通過多次循環的變性、退火和延伸步驟，待測DNA片段得以大量擴增。在PCR-SBT技術中，為了擴增出HLA基因的多態性區域，通常需要設計多個引物對。這些引物對能夠覆...

三一造血人血小板裂解液說明書

2024-10-15 【產品名稱】中文名稱：三一造血人血小板裂解液英文名稱：HumanPlateletLysate(HPL)【貨號】RC-002【規格】100mL/瓶、500mL/瓶【性狀】本產品為橙黃色略渾濁的液體，久置或反復凍融后，渾濁現象更明顯，并有絮狀沉淀產生。【運輸條件】采用干冰冷凍運輸。【貯藏條件與有效期】-20°C保存即可，長期儲藏可置于-80°C條件下；建議收到本產品后，將本產品于4°C條件下放置過夜或37°C水浴0.5-1小時進行化凍，然后分裝凍存；利用本產品配制的wan全培養基...

感受態細胞制備原理與舉例

2024-10-14 一、感受態細胞即受體細胞通過理化方法處理，使其處于最適攝取和容納外來DNA的生理狀態的細胞。二、感受態細胞制備原理將快速生長的大腸桿菌置于經低溫0℃預處理的低滲氯化鈣溶液中，便會造成細胞膨脹（滲透作用），同時，Ca2+會使細胞膜磷脂雙分子層形成液晶結構，促使細胞外膜與內膜間隙中的部分核酸酶解離開來，離開所在區域，誘導細胞成為感受態細胞。大腸桿菌DH5α感受態細胞三、大腸桿菌DH5α感受態制備實驗步驟實驗步驟一從-80℃冰箱中取出保種的DH5α菌株，用滅菌的槍頭吸取少量保菌液加...