夾心法與競爭法的ELISA檢測原理是什么？

2023-10-18 ELISA的原理是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。那么你知道夾心法與競爭法的ELISA檢測原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、夾心法原理夾心法使用的是兩個抗體夾抗原或者兩個抗原夾抗體的方法，這種復合物被稱之為三明治夾心結構，利用一對配對wan全的抗體，可以特異性檢測抗原，當然主要針對的是具有至少2個以上抗原表位的抗原，抗體的配對可是門技術活，很多公...

直接法與間接法的ELISA檢測原理是什么？

2023-10-18 在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。那么你知道直接法與間接法的ELISA檢測原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、直接法原理直接法是利用包被抗原，檢測抗體或者進行重組蛋白的活性驗證，利用蛋白與板材（即微孔板底）通過疏水鍵、流水/離子鍵的被動吸附,通過引入其它活性基團如氨基和碳基的共價結合，以及通過表面改性后的親水鍵結合等等，當然也有利用親和素預包被的板材，通過...

細胞凋亡與細胞壞死的不同點有哪些？

2023-10-17 你知道細胞凋亡與細胞壞死的不同點有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、定義細胞凋亡：細胞凋亡是一種正常的基因程序性細胞死亡，其中衰老細胞在其生命周期結束時收縮，其剩余片段被吞噬而沒有任何炎癥反應。細胞壞死：壞死是由于存在外部因素（如真菌或細菌毒素）而產生的信號導致細胞過早死亡。二、誘導細胞凋亡：當細胞發(fā)出DNA損傷或促凋亡和抗凋亡蛋白失衡的信號時，它就會被誘導。細胞壞死：它是由感染、外傷和毒素等外部存在因素引起的。三、形態(tài)變化細胞凋亡：可能會發(fā)生膜出血，但會保持膜的完整性。細胞壞...

ELISA實驗結果異常的因素有哪些？

2023-10-17 ELISA運用了免疫學原理和化學反應顯色原理，需要將抗原或抗體預包被在固相載體表面，使后來形成的抗原-抗體-酶（熒光基團）-底物復合物黏附在載體上，通過檢測OD值或發(fā)光值，來檢測靶蛋白的含量。ELISA適合用于定量檢測胞外的分泌性蛋白，檢測大分子抗原和特異性抗體等。那么ELISA實驗結果異常的因素有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、樣品樣品是檢測的前提，樣品質量會直接影響實驗結果。可以用ELISA來檢測的樣品很多，根據檢測項目不同可以是血清、血漿、唾液、尿液等，但大部分還是以血...

如何選擇ELISA試劑盒？

2023-10-17 酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay,ELISA)技術從1970年代發(fā)展至今已近半個世紀，是一項實驗室最基本的免疫檢測技術，被廣泛的應用于基礎研究和臨床檢驗。那么面對市面上數(shù)以千計的試劑盒，數(shù)百家供應商，該如何選擇適合的ELISA試劑盒呢？讓我們一起來看看吧！一、明確研究種屬一般來說，廠家都會在產品名稱上標明種屬，且為shou個單詞，檢索種屬的常用語言為英文。如果您需對不同物種的同一因子進行定量，建議優(yōu)先尋找適用于多個種屬的ELIS...

ELISA樣本處理的注意事項有什么？

2023-10-17 ELISA的檢測目的是為了實驗提供準確的實驗依據，為了保證實驗數(shù)據的可靠性，在實驗過程中必須堅持全面的質量控制和全過程質量控制，在收集標本前都必須有一個完整的計劃。那么你知道ELISA樣本處理的注意事項有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、每個樣本量收集體積=100ulx檢測種類，如果要做復孔，標本量收集體積=100ulx檢測種類x2。二、樣本收集后若在一周內進行檢測可保存于2-8°C，若不及時檢測，請進行分裝，凍存于-20°或-80°C，避免反復凍融。三、試劑盒的檢測范圍不等同...

蛋白檢測條帶的常見問題有哪些？如何解決？

2023-10-16 你知道在蛋白檢測中條帶的常見問題有哪些？該如何解決嗎？讓我們一起來看看吧！一、條帶出現(xiàn)位置比預期低或高①當條帶出現(xiàn)位置比預期低：原因：目的蛋白經過剪切或降解，有相同或相似抗原表位的蛋白被抗體檢測出解決辦法：樣品準備時候要在冰上操作；加入更過蛋白酶抑制劑；更換別的抗體②當條帶出現(xiàn)位置比預期略高：原因1：蛋白可能被糖基化，或氨基酸基被修飾解決辦法：使用酶去除可能的蛋白修飾；檢查抗原序列原因2：可能有融合蛋白解決辦法：查看表達序列原因3：蛋白形成二聚體或多聚體解決辦法：加強變性條件...

引物的純化方法有哪些？

2023-10-16 你知道引物的純化方法有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、脫鹽寡核苷酸合成后，為了純化寡核苷酸成為天然的DNA結構，首先必須去除保護基團。通過濃氨水處理，合成的寡核苷酸從固相載體上分離，2-氰乙氧基--磷酸二脂鍵的保護基團，以及堿基的保護基團基（苯甲酰基和異丁基）被去除，從而形成了天然的DNA結構。然而，必要的去保護步驟完成后，寡核苷酸混合物還包含幾種必須被去除的小分子有機化合物。所有非必須有機化合物被移除的過程通常叫做脫鹽。脫鹽純化可以借助反向硅膠柱進行。盡管脫鹽純化可以移除所...