研究蛋白質相互作用的方法有哪些？

2023-11-02 相當多的蛋白質行使功能的時候并不是單打獨斗的，蛋白質們通過蛋白質相互作用形成復合體然后進行工作。因此，研究蛋白質的相互作用成為研究蛋白質功能和作用機制的最為重要的環節之一。那么你知道研究蛋白質相互作用的方法有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、酵母雙雜交系統原理：很多真核生物的位點特異轉錄激活因子通常具有兩個可分割開的結構域，即DNA特異結合域（DNA-bindingdomain,BD）與轉錄激活域（Transcriptionalactivationdomain,AD）。這兩個結...

ELISA實驗的操作要點有什么？

2023-11-01 優質的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，那么你知道ELISA實驗的操作要點有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液)，有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白...

RNA提取準備工作及注意事項有什么？

2023-11-01 你知道RNA提取準備工作及注意事項都有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、槍頭和EP管等的消毒滅菌1.用去離子水配制0.1%（千分之一）的DEPC（劇毒物），須在通風櫥中小心使用，避光密閉4℃保存;DEPC水是用DEPC處理過并經高溫高壓消毒的純水。經檢測不含RNase、DNase和proteinase。2.將槍頭和EP管放入0.1%的DEPC內，保證槍頭和EP管內都充滿0.1%的DEP。3.避光、靜置、過夜（12-24h）4.裝槍頭和EP管的盒子不需要用DEPC浸泡，將槍頭或者...

如何配置培養基？

2023-10-31 你知道該如何配置培養基嗎？讓我們一起來看看吧！一、細胞實驗全程注意事項1.無菌操作是重中之重，細胞培養對無菌條件比較苛刻，實驗人在進行整個細胞實驗的無菌意識一定要強，否則一個不小心，發生細菌污染，輕則浪費細胞，重則污染整個培養箱。2.實驗人員進入細胞房前應該換上干凈的鞋子、白大褂、手套和口罩。3.所有耗材放入工作臺前都需用75%酒精進行消毒，雙手進入工作臺前也需要用75%的酒精進行消毒。4.進行實驗前應先對工作臺進行紫外滅菌30min以上，并將所有需要用到的耗材放到工作臺上一...

如何選擇合適的培養基？

2023-10-31 培養細胞的重要環節有很多，其中很重要的一步就是為細胞選擇適合的生長環境，為其選擇成分適合又營養豐富的細胞培養基。細胞培養基是供給細胞營養、維持細胞生長和增殖的多種營養物質的混合物，種類一般包括經典/基礎培養基、無血清培養基以及化學成分確定的培養基等。那么該如何選擇合適的培養基呢？讓我們一起來看看吧！1.RPMI-1640培養基RPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正?；驉盒栽錾陌准毎?，雜交瘤細胞的培養，是目前應用十分廣泛的培養基。主要用于懸浮細胞培養。其它像K...

影響WB實驗的因素有什么？

2023-10-30 WB實驗是分子生物學中最為常見的實驗，那么你知道影響WB實驗的因素有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、蛋白樣本制備1.蛋白質的樣品制備注意以下問題：（1）在合適的條件下，保持蛋白質的最大溶解性和可重復性。（2）選擇合適的表面活性劑和還原劑，使其形成各自多肽的溶液。（3）盡量去除核酸，多糖，脂類等分子的干擾，裂解完畢離心之后取中層澄清溶液時避免吸到底層沉淀和上層脂類。（4）整個制作蛋白樣本的制備過程必須在低溫下進行，避免細胞破碎釋放出各種酶類，但是注意不要反復凍融。（5）所抽取樣...

DMEM和1640培養基有哪些不同？

2023-10-30 培養基有很多不同的名字是因為根據不同細胞的培養和應用場景，培養基可以分為多種類型，最常見的是DMEM、RPMI-1640、MEM等。這些培養基有自己的配方特點和適用范圍。那么你知道DMEM和1640培養基有哪些不同嗎？讓我們一起來看看吧！DMEM(Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium)是一種zui廣泛應用的細胞培養基之一，它是由Eagle于1959年開發出來的，后由Dulbecco進行了改良。DMEM主要適用于肝臟、腎臟、肺、心臟等多種類型的哺乳動物...

細胞培養實驗常見問題有哪些？

2023-10-27 你知道細胞培養實驗常見問題有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、細胞污染和感染的處理方法細菌污染：如發現細胞培養物出現混濁或異味，可能存在細菌污染。立即停止細胞培養，對細胞培養器具進行嚴格的消毒和清潔，更換新的細胞培養物和培養基。真菌污染：真菌污染常常表現為細胞培養物表面的白色或黑色斑點。細胞培養器具應che底清潔，細胞培養物可以添加抗真菌劑來預防和處理。細胞病毒感染：如發現細胞培養物出現明顯的細胞溶解和變形，可能存在細胞病毒感染?？墒褂每共u藥物來處理感染，并且進行核酸檢測以...