什么是液體培養基？它的組分有哪些？

2023-10-26 細胞培養，是人工創造與體內生長相似的環境，使細胞生長、繁殖并維持主要結構和功能的技術。培養基是一切體外培養的基礎，為細胞的生長和代謝活動提供了各種必需的營養物質。根據培養基的來源和組成成分，它的發展經歷了三個階段，分別是天然培養基階段、合成培養基階段以及無血清培養基階段。那么你知道什么是液體培養基嗎？它的組分是什么嗎？讓我們一起來看看吧！在20世紀50年代，當時體外培養普遍直接采用組織凝塊、生物性液體和組織提取液，如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸液等，這就是天然培養基階段。由...

液體培養基的常見問題有哪些？

2023-10-26 液體培養基是最為常見的培養基類型，它具有可進行通氣培養或振蕩培養的優勢，因為它的流動性便于精確控制培養基的溶液溫度、營養濃度和氣體含量等；它對細胞生長時的附著能力要求小，細胞可快速擴增；當需要大量細胞培養時也更經濟高效。那么你知道液體培養基的常見問題有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、液體培養基為什么顏色不一樣酚紅加量不同，導致顏色差異：DMEM＞MEM＞DMEM/F12＞RPMI1640＞F12&F10。二、培養基放冰箱里顏色變深空氣中CO2濃度低，培養基內CO2會逐漸溢出，...

你知道什么是瓊脂糖凝膠電泳嗎？

2023-10-25 你知道什么是你知道什么是瓊脂糖凝膠電泳嗎？讓我們一起來看看吧！一、瓊脂糖凝膠的特點核酸分子是兩性解離分子，在高于其等電點的電泳緩沖液中，其堿基不解離，而磷酸基團全部解離，核酸分子因而帶負電荷，電泳時向正極遷移。瓊脂糖主要從海洋植物瓊脂中提取而來并經糖基化修飾，為一種聚合鏈線性分子，使用瓊脂糖凝膠作為電泳支持介質，發揮分子篩功能，使得大小和構象不同的核酸分子的遷移率出現較大差異，從而達到分離的目的。因此，目前多用瓊脂糖為電泳支持物進行平板電泳，其優點如下。（1）瓊脂糖凝膠電泳操...

瓊脂糖凝膠電泳實驗的試驗方法是什么？注意事項有什么？

2023-10-25 你知道瓊脂糖凝膠電泳實驗的實驗方法是什么嗎？有什么注意事項呢？讓我們一起來看看吧！一、瓊脂糖凝膠電泳實驗方法1.擇適合樣品預期片段大小的瓊脂糖凝膠濃度百分比。將瓊脂糖粉末與用于運行凝膠的相同類型的緩沖液（TAE）結合起來，加熱使混合物融化，避免沸騰。2.選擇所需尺寸的凝膠澆注模具和梳子，為樣品和marker提供足夠數量的孔，以及容納每個待裝樣品數量的孔容量。3.膠凝固后，將凝膠放入電泳儀中，電泳液沒過凝膠，根據加入量的多少，決定混合多少ul的lodingbuffer，將樣液混...

如何選擇DNA提取方法

2023-10-25 DNA的提取可以簡單的分為裂解和純化兩大步驟，裂解是破壞樣品細胞結構，從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過程，純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分，如蛋白質、鹽及其它雜質分離的過程。那么該如何選擇DNA提取方法呢？讓我們一起來看看吧！一、酚氯仿抽提法酚氯仿抽提是去除蛋白質的有效手段，但如果蛋白質含量超過了其飽和度，裂解體系中的蛋白質就不會被一次性去除，需要進行多次反復抽提，而每次的抽提均會導致核酸的損失。酚氯仿抽提的優勢是成本低廉，對實驗條件要求較低。二、高鹽沉淀法高鹽...

熒光原位雜交（FISH）的實驗步驟是什么？

2023-10-24 熒光原位雜交（FluorescenceinsituhybridizationFISH）是一門新興的分子細胞遺傳學技術，是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。那么你知道熒光原位雜交（FISH）的實驗步驟是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、實驗材料準備1.實驗用具及材料（1）人的MyoD1（MYF3)基因探、人外周血中期染色體細胞標本；（2）指甲油、甲酰胺、氯化鈉、檸檬酸鈉、氫氧化鈉、吐溫20等；（3）恒溫水浴鍋、培養箱、染色缸...

蛋白表達的常見問題有哪些？

2023-10-24 蛋白表達實驗的時，有時候實驗會覺得參考實驗方法和克隆的蛋白基因序列wan全沒有問題，但蛋白電泳就是沒有結果。下面讓我們一起來看看蛋白表達的常見問題有哪些吧！1、載體構建錯誤，很多克隆新人經常弄錯讀碼框。比如Qiagen的pQE系列載體，其克隆位點常有一兩個堿基的區別；另外有些酶產生粘端有些酶產生平端，這些都容易導致讀碼框錯誤，從而表達不出來。2、宿主菌選擇不當，不同的宿主菌其基因型是不一樣的。有些經過特殊修飾的載體，或者特殊用途的載體，或者有特殊啟動子的載體，必須選擇合適的宿...

PCR反應體系主要是什么？

2023-10-23 你知道PCR反應體系主要包含那些嗎？讓我們一起來看看吧！一、模板（template)模板即擴增用的DNA，可以是任何來源DNA(如基因組DNA、質粒DNA等)或RNA（如總RNA、mRNA、tRNA、rRNA、病毒RNA等），但必須符合兩個條件：一是純度必須較高，二是濃度不能太高以免抑制。模板是待擴增的目的基因或特異片段，如診斷病人是否攜帶有突變基因時，其模板就是提取的病人血液中的DNA或RNA片段。PCR對模板DNA的純度不要求很高，但應盡量不含有對PCR反應有抑制作用的雜...