細胞傳代培養的常見問題有哪些？

2024-01-10 細胞培養是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環境下，在無菌、適溫和豐富的營養條件下，使其生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。那么你知道細胞傳代培養的常見問題有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、細胞何時進行傳代通常當細胞生長至wan全匯合進行傳代，避免細胞生長過密，對于特殊情況，比如有接觸抑制的細胞，一般在密度70-80%就進行傳代，避免引起細胞分化。二、貼壁細胞胰酶消化如何控制時間貼壁細胞培養一個關鍵步驟胰酶消化，消化過度會導致細胞碎片增多，細胞成片脫落，嚴重影響細胞活...

雙熒光素酶實驗的注意事項有哪些？

2024-01-09 雙螢光素酶報告基因通常以螢火蟲螢光素酶為報告基因，以海腎螢光素酶為內參基因，如此所構成的報告系統有檢測靈敏度高、動態范圍廣、內參平衡等優勢，因此在實驗中得到廣泛應用。那么你知道雙熒光素酶實驗的注意事項有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、熒光值過高熒光值過高可能會超出儀器檢測范圍，從而檢測不到值，一般讀數在5-6位之間較好。熒光值過高可通過以下方式嘗試解決：1.減少質粒轉染量；2.細胞樣品裂解后，離心取上清后檢測或對裂解產物進行稀釋后檢測。（注：不建議通過減少底物量來降低熒光值，...

你知道什么是雙熒光素酶實驗嗎？

2024-01-09 在基因表達調控的研究中，報告基因廣泛應用，如熒光蛋白、真核抗性和熒光素酶等。在一些臨床醫學或基礎醫學文章中，雙熒光素酶結合驗證實驗部分是多數機制研究bi備的實驗部分，例如：在通路研究中，尤其涉及到miRNA與功能基因的相互作用時，雙螢光素酶報告基因檢測實驗是bi備的實驗要點。那么你知道到底什么是雙熒光素酶實驗嗎？讓我們一起來看看吧！螢光素酶（Luciferase）是自然界中能夠產生生物螢光的酶的總稱，其中應用較為廣泛的是螢火蟲螢光素酶（Fireflyluciferase）和海...

Alzet滲透泵在動物實驗中的操作流程

2024-01-08 滲透泵是一種常用于動物實驗的工具，用于持續、精確地給予動物藥物或其他溶液。Alzet滲透泵已用于數千項關于控制輸送各種實驗劑（包括肽、生長因子、細胞因子、化療藥物、成癮藥物、激素、類固醇和抗體）影響的研究。由于Alzet滲透泵的du特運行機制，任何分子構象的化合物都可以以可控的速率以可預測的速度輸送，而不受其物理和化學性質的影響。那么你知道Alzet滲透泵在動物實驗中的操作流程嗎？讓我們一起來看看吧！一、準備工作：1.檢查Alzet泵的有效期，確保其在使用期限內。2.準備所需...

你了解胎牛血清的儲存條件嗎？

2024-01-08 zhong所周知，胎牛血清是細胞培養實驗中的一把“好手”，在細胞的茁壯成長過程中起到十分關鍵的作用，比如胎牛血清里存在粘附因子、生長因子、激素、脂質、鋪展因子、糖類、轉運蛋白、維生素等有益于細胞生長，進行標準的胎牛血清存儲操作對于其發揮作用十分重要，那么你了解胎牛血清的儲存條件嗎？以下是一般建議的胎牛血清儲存條件：1.溫度：胎牛血清應儲存在-20℃或更低的溫度下。冷凍儲存可以延長胎牛血清的保質期。2.避光：胎牛血清容器應避免直接暴露于光線中，因為光照可能會降解其中的成分。可以...

保存蛋白質的原則及方法有哪些？

2024-01-08 在完成蛋白質純化后，如果保存不當，容易發生失活和變性的情況，那么你知道保存蛋白質的原則及方法有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！一、原則1.低溫保存蛋白質時，確保在低溫條件下至關重要。低溫意味著較低的能量水平，有助于減緩蛋白質分子內部的熱運動，減少鍵的斷裂可能性。此外，在低溫下，微生物繁殖減緩，潛在的蛋白酶活性降低，從而有助于維持蛋白質的活性。2.無菌在進行蛋白質實驗操作時，務必佩戴手套。盡管實驗室戴手套通常是為了保護實驗者自身，但在生化實驗中，蛋白質是我們需要保護的主體。我們皮膚...

免疫共沉淀實驗的原理是什么？有何注意事項？

2024-01-08 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CoIP）是一種常用的分子生物學實驗技術，用于研究蛋白質間的相互作用及其與其他分子的結合。該實驗通過將抗體與特定蛋白質結合，然后利用這種結合來沉淀目標蛋白質和與其相互作用的分子。那么你知道免疫共沉淀實驗的原理是什么嗎？有何注意事項？讓我們一起來看看吧！一、基本原理：首先在非變性條件下使用溫和的細胞裂解液裂解細胞，此時存在于完整細胞內的蛋白質與蛋白質之間的相互作用被保留了下來。隨后向細胞裂解液中加入偶聯某種抗體的瓊脂糖珠...

胎牛血清在細胞培養中有什么用？

2024-01-05 胎牛血清是一種常用的細胞培養基添加劑，可以提供細胞生長和增殖所需的營養物質、生長因子和激素等。胎牛血清由新生牛犢提取，含有豐富的蛋白質、氨基酸、維生素和礦物質等。那么你知道胎牛血清在細胞培養中有什么用嗎？讓我們一起來看看吧！一、作為細胞培養基組分胎牛血清通常作為細胞培養基的添加劑，用于提供細胞生長和增殖所需的營養物質、生長因子和激素等。具體來說，胎牛血清中含有以下主要組分：1.蛋白質：胎牛血清是一種富含蛋白質的添加劑，其中包含多種不同種類的蛋白質，如血清白蛋白、球蛋白、免疫球...